神奇汤剂桂枝芍药知母汤，竟能重塑肠道菌群，逆转痛风性关节炎，大鼠实验效果惊人！

痛风性关节炎（GA）是一种因尿酸代谢异常所引发的全身性病症，常与高脂血症、高血压、糖尿病及慢性肾病等多种慢性疾病并存，对患者的日常生活质量构成显著影响。GA的临床表现特征主要包括红肿、发热、疼痛等症状，严重时甚至可能导致关节及周围组织功能的丧失，需借助药物进行缓解。当前，一线治疗药物主要包括秋水仙碱、非甾体抗炎药及糖皮质激素等，这些药物在缓解急性GA发作方面显示出良好的疗效。然而，长期使用此类药物可能引发对胃肠道、肝脏、肾脏及免疫系统等的不良反应，需引起临床关注。

桂枝芍药知母汤（GSZD），作为一种经典的中药方剂，其主要功效涵盖祛风除湿、通阳散寒，并辅以清热。据《金匮要略》记载，该方剂主要用于治疗肢体关节疼痛、脚部肿胀等症状。长久以来，GSZD在中医临床实践中被广泛应用于治疗“痹症”，特别是针对GA、骨关节炎、类风湿性关节炎等疗效显著。临床研究证实，GSZD能有效缓解关节炎引起的疼痛和肿胀，减轻炎症反应。然而，关于GSZD在治疗GA中的具体作用机制，尚需进一步深入研究和探讨。

近日，一篇名为“Guizhi Shaoyao Zhimu Decoction ameliorates gouty arthritis in rats via altering gut microbiota and improving metabolic profile”的文章探究了GSZD对GA的治疗作用及其潜在的药理机制。

图1 论文首页

GSZD改善GA大鼠关节症状，减轻骨侵蚀

踝关节肿胀是GA疾病中常见且显著的临床表现。为准确评估其程度，研究采取测量踝周长的方法，以此量化对照组与治疗组大鼠的踝关节肿胀程度（ASD）（图2A）。与CON组相比，关节内注射尿酸结晶（MSU）的大鼠在各个观测时间点的ASD均呈现出显著增长（p<0.05）。然而，MSU注射后的2、4、8、12、24和48小时，GSZD（3.2或1.6g/kg）能够显著减轻大鼠的ASD（p<0.05）（图2B）。同样，双氯芬酸钠治疗组（DS，3 mg/kg/周）在MSU注射后的8、24和48小时也表现出对水肿形成的缓解效果，且此效果在实验期间内得以维持。

此外，研究利用HE染色的组织切片对踝关节滑膜、关节和软骨的组织学变化进行了细致分析（图2C）。病理切片结果显示，MOD组中存在滑膜增生、炎症细胞流入滑膜内膜及关节软骨破坏等现象。而DS和GSZDH组，炎症细胞浸润和滑膜增生均有所减轻。研究还揭示了GSZD与组织修复之间的剂量依赖性关系，具体表现为低剂量组大鼠的抗炎浸润和抗增殖特性相对较弱于高剂量组。结果均提示，GSZD在GA治疗大鼠中具有改善关节症状、减轻骨质侵蚀的潜在作用。

为了更全面地评估其药效学效果，研究进一步检测了血清中炎症因子（LPS、TNF-α 和 IL-1β）以及GA的关键指标（UA）的水平。与CON组相比，MOD组中LPS、TNF-α、IL-1β 和 UA的血清水平均显著升高（p<0.05）（图2D）。然而，GSZD的暴露能够有效防止这些指标的异常升高（p<0.05）。

基于关节症状和骨质侵蚀的评估结果，研究确认GSZD能够显著降低ASD、减轻骨质侵蚀，并下调TNF-α 和 IL-1β的表达。此外，高剂量的GSZD在药效学上表现出比低剂量和中剂量更为显著的效果。

图2 GSZD对痛风性关节炎大鼠关节症状及骨质侵蚀的药理作用

肠道菌群、代谢物和 GA 相关指标之间的相关性分析

研究发现，GSZD能够有效调节GA大鼠的肠道菌群组成，并影响血清代谢组学。为此，该研究采用了Spearman相关性分析，并通过可视化相关性热图来深入探究血清代谢物与不同门、科、属菌群之间的相关性，以及微生物群代谢物与临床指标之间的潜在关联，特别是与UA、LPS、TNF-α和IL-1β等临床指标的相关性。

在门水平上，12(R)-hete、enantio-paf c-16、1-硬脂酰甘油磷酸胆碱和lysoPC(17:0)与变形菌门呈现正相关关系，而三氯乙醇葡萄糖醛酸苷、lysoPC(18:1(9Z))、lysoPC(16:1(9Z))和pc(18:1/0:0)则与变形菌门呈负相关（图3A）；在科水平上，16-羟基-10-氧代十六烷酸、serratol、15-酮-13,14-二氢前列腺素a2、8-异丙基苯甲酸1、氟利昂酸和前列腺素f1a与毛螺菌科存在正相关关系，而胆酸、溶血PC(15:0)和PC(16:0/0:0)则与毛螺菌科呈负相关（图3B）；在属水平上，溶血PC(18:0)、12(R)-hete和enantio-paf c-16与Turicibacter属正相关，而serratol、氟利昂酸、5-乙酰氧基二氢茶螺烷和薄荷碳酸乙二醇酯则与其呈负相关（图3C）。

图3 肠道菌群、血清代谢物与 GA 相关临床因素相关性分析热图

此外，在肠道菌群与临床因素相关性的分析中，研究观察到肠道菌群能够显著影响临床因素的表达，其中乳酸杆菌与所有临床因素均呈正相关，而Turicibacter则与除LPS外的多数临床因素呈负相关（图3D）。同样，代谢物也能显著影响临床因素的表达，例如氟离子酸的增加会导致临床因素表达的上调，而溶菌酶pc(16:1(9z))的增加则会下调临床因素的表达（图3E）。充分表明血清代谢物的变化与肠道菌群的改变以及GA相关的临床因素之间存在密切的关联（图4）。

图4 GA潜在代谢途径及GSZD治疗作用

GSZD改善嘌呤代谢、抑制炎症

肠道菌群与血清代谢组学分析显示，GSZD通过调整肠道菌群结构，优化了嘌呤代谢等生物学过程，从而实现了减轻炎症反应的药效学功能。研究选择了相关基因和蛋白质对此进行验证。

结果显示，与嘌呤代谢紧密相关的腺核苷去氨酶（ADA）和鸟嘌呤脱氨酶（GDA）这两种关键酶在MOD状态下表达显著上升，而在GSZD作用下则呈下降趋势（图5A），这强烈提示GSZD可能通过抑制这些关键酶的活性来降低尿酸的生成。此外，GSZD显著增加了回肠组织中Occludin和Zo-1的表达（图5B），这一发现暗示GSZD可能强化了肠道屏障的紧密连接功能。

最后，为了验证GSZD在GA治疗中能否有效减轻炎症反应，研究选择了LPS的靶受体TLR4炎症通路作为研究对象，检测了其蛋白活化情况。结果显示，MOD大鼠踝关节组织中TLR4、MYD88、p-NF-κB P65蛋白的表达明显高于CON组，而经过GSZD干预后，GA模型大鼠踝关节组织中上述蛋白的表达均有所下调（图5C）。结果进一步支持了GSZD在GA治疗中减轻炎症反应的潜在作用。

图5 验证实验结果及本研究的图示说明

结论

研究表明，GA与肠道菌群和血清代谢的紊乱状态存在显著的相关性。而GSZD在改善这一紊乱状态方面展现出了显著效果。具体而言，GSZD通过提升参与尿酸转运的菌群的丰富度等来有效缓解了GA所引发的问题。

参考文献：

Bian M, Zhu C, Nie A, Zhou Z. Guizhi Shaoyao Zhimu Decoction ameliorates gouty arthritis in rats via altering gut microbiota and improving metabolic profile. Phytomedicine. 2024 Aug;131:155800. doi: 10.1016/j.phymed.2024.155800